Anne Diehl

Protein Expression and NMR Sample Preparation

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Rekombinante Protein Produktion

… FÜR DIE STRUKTURBIOLOGY

NMR benötigt immer noch relative große Proteinmengen ( Lösungs-NMR z.B. 600µl 500µM Protein) im Unterschied zur Elektronenmikroskopie und Röntgenkristallographie. Deshalb ist es auch relativ einfach für uns, neben den NMR-Bedürfnissen, auch noch die, der anderen beiden strukturbiologischen Methoden zu erfüllen und mit Dr. Daniel Roderer (Cryoelektronenmikroskopie am  FMP) und Dr. Yvette Roske (Kristallographie am MDC) zu kooperieren. Durch diese Kombination bekommen wir die umfassendsten strukturbiologischen Informationen, die derzeit möglich sind.

Die Markierung der Proteine mit stabilen Isotopen (15N, 13C, 2H) ist für hochauflösende NMR-gestützte Strukurbiologie notwendig. Die Expression von Proteinen muss auf definiertem Minimalmedium (M9) mit teuren, stabilen Isotopen als N- und C-Quellen stattfinden. Da die Medienkosten steigen, je anspruchsvoller die Wirte sind, nutzen wir als Zellfabriken nur E. coli und Pichia pastories.

 

Publikationen

Biofilm of B. subtilis expressing GFP

 

B. subtilis biofilm
GFP expressed in Biofilm

Kontakt

Dr. Anne Diehl

Senior Wissenschaftler:in, Oschkinat Gruppe,
Gentechnik und biologische Sicherheit

+49 30 94793 310
Diehl@fmp-berlin.de

Forschungsbereich

Strukturbiologie

Nils Cremer

Martina Leidert

Kristina Rehbein

Cell desintegration

Check folding of expressed proteins

Protein purification

Analytical ultracentrifugation

Spülküche: Beata Döring (TRH) Beatrix Kaping, Roy Wolschke (FMP)

Nils
Martina
rehbein
LM10
andromeda
Äkta pure
AUC

Nils Cremer

Nils

Martina Leidert

Martina

Kristina Rehbein

rehbein

Cell desintegration

LM10

Check folding of expressed proteins

andromeda

Protein purification

Äkta pure

Analytical ultracentrifugation

AUC

Spülküche: Beata Döring (TRH) Beatrix Kaping, Roy Wolschke (FMP)

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